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检验中心开展蛋白印迹法检测梅毒螺旋体IgM抗体

应临床相关科室迫切需求,我院检验中心近期开展了梅毒螺旋体IgM抗体。主要用于先天梅毒的辅助诊断。

一、临床意义

先天梅毒(Congenital syphilis)是指梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)由母体经过胎盘进入胎儿血循环使胎儿感染而发生的梅毒,可引起胎儿流产、早产、死胎或新生儿全身性感染。先天性梅毒大多症状不明显,多为隐匿感染,更因母体内抗体因素的影响与干扰,其临床诊断缺乏准确性,难度较大,常延误治疗时机。

先天梅毒的诊断目前主要还是依靠患儿的病史、临床表现及实验室检查来综合判断。对于有早期胎传梅毒的临床表现或血清RPR滴度高于母亲4倍以上的患儿诊断不难,但在临床上很多梅毒患儿出生时并无早期胎传梅毒的临床表现,且梅毒血清学检查RPR滴度与产妇分娩时相同或更低,确定诊断比较困难,容易导致漏诊。与此同时,常规梅毒血清抗体检测方法如TPPA、RPR均检测IgG抗体,此类抗体能通过胎盘,进入胎儿体内,因此在新生儿检测到RPR及TPPA阳性还不能确认是否患有先天梅毒。对这些可疑病例,在生后0、2、4和6个月监测血清学变化,6个月时如呈阴性,且无先天梅毒的临床表现,可除外梅毒感染;6个月后若RPR未转阴,始终维持在低滴度水平,应每3个月检测TPPA至产后18个月,若TPPA转阴,可排除感染。这一漫长的随访过程容易导致先天梅毒患儿错失最佳的治疗时间,部分失访患儿也错失了正规的梅毒治疗。所以对无症状新生儿先天梅毒的早期诊断方法的研究尤为重要。

梅毒螺旋体与其他微生物一样,进入机体后首先刺激淋巴细胞产生 IgM 抗体,然后是 IgG 和 IgA 抗体。IgM相对分子质量为900 000,一般不能通过胎盘等生理屏障组织,只有胎儿在宫内受到梅毒感染,在新生儿血清中才会出现特异性 TP-IgM 抗体,且TP-IgM 抗体治愈后可逐渐消退。梅毒孕妇的IgG抗体可穿透胎盘滋养层,进入到胎儿的血液循环中去。因此,对常规梅毒血清学检测法TPPA及RPR检测出的抗体很难判定是否来自胎儿本身。故患儿特异性TP-IgM 抗体阳性是诊断先天梅毒的有力证据。

蛋白印迹是20世纪80年代发展起来的一种先进的检测技术,根据抗原抗体的特异性结合来检测复杂样品中某种蛋白的免疫生化技术。试验中,血清抗体与固相分离的天然或重组抗原结合后,通过与酶标记的IgM二抗结合以及酶标二抗与底物的显色反应而显示抗原特异性条带,特异性条带的数目和深浅作为判断检测结果,检测梅毒特异性多肽抗原不需特殊的仪器设备,观察结果不带有主观性。其他的IgM检测法需先分离血清IgG抗体,以防止IgG与IgM抗体竞争特异性抗原结合位点,导致IgM抗体的假阳性,WB法则不受IgG抗体存在的影响,对其他非梅毒螺旋体标本没有生物假阳性。

检验中心新近开展了蛋白印迹试验检测梅毒螺旋体IgM抗体,为先天梅毒的诊断提供实验室依据。

二、标本送检要求:

1.空腹抽血2ml,使用真空采血管(红色管)。

2.避免标本溶血、脂血。

三、送检地点及联系方式

1.检测地点:门诊七楼检验中心免疫室。

2.咨询联系电话:0931-8281605。

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